Диагностика герпетической инфекции. РНГА применяется для выявления антител к Tr. pallidum при лабораторной диагностике сифилиса. Иммунологическая диагностика инфекционных заболеваний основана на выявлении антител в организме пациента к возбудителю инфекции методами серологических исследований.

В этом случае из двух компонентов реакции (антитела, антиген) неизвестным является сыворотка крови. Постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами (диагностикумами).

При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и большее повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение. Серологические реакции, благодаря высокой специфичности и чувствительности, применяют для выявления и количественного определения антигенов и антител.

Из всех серологических методов диагностики сифилиса ИФА метод является наиболее чувствительным (свыше 95%) и специфичным (100%)

Различают прямую и непрямую реакции агглютинации. Нагруженные антигеном эритроциты склеиваются в присутствии специфических антител к данному антигену и выпадают в осадок. Реакция непрямой гемагглютинации используется для определения в сыворотке больного антител к сальмонеллам, шигеллам,Yersinia pseudotuberculosis, Aspergillus fumigatus, Candida albicans.

Методы ИФА обладают высокой чувствительностью и специфичностью и получили наиболее широкое распространение среди иммунологических методов клинико-лабораторной диагностики. На основе реакции иммуноблотинга созданы диагностические наборы для определения в сыворотке больного антител к вирусу гепатита С и ВИЧ-1-2. При использовании метода ИФА выявляются антитела класса IgM и IgG. Антитела класса IgM имеют важное значение для диагностики первичного, вторичного и врожденного сифилиса.

Определение антител IgG применяется для диагностики кори и оценки напряженности противокоревого иммунитета

Диагностика кори. Возбудитель кори — Рolinosa morbillarum относится к классу РНК-вирусов. Антитела IgG появляются в период реконвалесценции и у переболевших сохраняются до 10 лет. Появление антител IgG в конце острого периода заболевания является прогностически благоприятным признаком.

Серологические реакции применяются в двух направлениях. 1. Обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, гомологичных применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых. Достоверные результаты получают при исследовании “парных” сывороток крови больного, взятой в первые дни болезни и через разные промежутки времени от начала заболевания.

Реакции антиген-антитело в системе in vitro могут сопровождаться возникновением нескольких феноменов — агглютинации, преципитации, лизиса. Поливалентность антигенов и антител обеспечивает возникновение видимых невооруженным глазом агрегатов.

Характер и выраженность реакции зависят от количественного соотношения антигенов и антител. Агрегаты, способные выпадать в осадок, образуются при соединении антигенов с полными антителами. Неполные антитела (моновалентные) не вызывают образования сетевых структур и крупных агрегатов.

Прямой метод одноэтапный: на фиксированный мазок клеток с антигеном наносят диагностическую сыворотку с мечеными антителами, инкубируют, отмывают и учитывают свечение в люминесцентном микроскопе

Количество иммунореагентов в реакциях выражают титром — максимальным разведением сыворотки или антигена, при котором еще наблюдается реакция. Краткая характеристика серологических методов исследования. В зависимости от вида используемого иммунодиагностикума различают реакцию микробной агглютинации, гемагглютинации, латексагглютинации, коаглютинации и т.д.

Однако, повышение антител класса IgM может не выявляться в течение первых 4 недель после начала заболевания

В этой реакции антитела (агглютинины) непосредственно агглютинируют корпускулярные антигены (агглютиногены). Диагностическую сыворотку разводят до титра и вносят одинаковые количества антигена. Для определения антител в сыворотке больного (серологический диагноз) используют стандартный микробный диагностикум, содержащий взвесь известных микробов или их антигенов.

Затем вносят исследуемую сыворотку, в которой хотят обнаружить антитела к данному антигену

Используется для определения групп крови. Применяются стандартные сыворотки крови доноров, содержащие известные анти-А или анти-В антитела. Если нагрузить эритроциты антителами, то их можно применять для выявления антигенов. Используются для выявления «неполных» (неагглютинирующих) антител, которые образуются при различных заболеваниях: резус конфликте, аутоиммунных заболеваниях. Прямая реакция: к отмытым эритроцитам крови больного добавляют антииммуноглобулиновую сыворотку.

Непрямая реакция выявляет свободные антиэритроцитарные антитела в сыворотке крови больного. К сыворотке крови больного добавляют отмытые эритроциты донора 0(1) группы крови. Смесь инкубируют при 37 градусах Цельсия в течение 30 минут и отмывают эритроциты. Если в сыворотке больного были неполные антиэритроцитарные антитела, то наступает агглютинация. Реакция связывания комплемента (РСК). В РСК помимо антигена и антител принимает участие третий компонент — комплемент, который способен связываться с комплексом антиген-антитело.

Чувствительность используемых серологических методов приведена в таблице. Иммуноферментный метод диагностики сифилиса. Для лабораторной диагностики кори используются РНГА, РСК и метод иммуноферментного анализа, определение антител IgМ и IgG к вирусу кори в сыворотке. Определение антител IgM применяется для диагностики острого периода коревой инфекции. Диагностика вирусного паротита. Основным методом лабораторной диагностики эпидемического паротита является определение антител классов IgМ к вирусу паротита в сыворотке.